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支原體DNA抽提Kit的操作方法

更新時(shí)間:2022-10-25  |  點(diǎn)擊率:795
  支原體DNA抽提Kit有如下幾種情況。如細(xì)胞培養(yǎng)液中存在抑制PCR的物質(zhì),這時(shí)就需要提取。細(xì)胞培養(yǎng)基中的血清濃度如果超過(guò)12%,那么對(duì)下游的PCR反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生抑制。酚紅,對(duì)熒光定量PCR的檢測(cè)也會(huì)干擾。這些均可以通過(guò)使用Miverva公司的支原體DNA提取試劑盒來(lái)克服。對(duì)于樣品類型是細(xì)胞團(tuán)、疫苗、凍存細(xì)胞和石蠟包埋的組織,也需要提前提取DNA。另外,如果樣品中蛋白含量高于10mg/ml,則先需要用蛋白酶K進(jìn)行處理。
  支原體DNA抽提Kit與細(xì)胞培養(yǎng)高度重合的培養(yǎng)條件,注定了支原體要與細(xì)胞共同競(jìng)爭(zhēng)有限的生存資源。
  早有研究表明,一些支原體(包括最為常見(jiàn)的人型支原體、發(fā)酵支原體、精氨酸支原體等),通過(guò)精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來(lái)供能。當(dāng)這些支原體混入細(xì)胞培養(yǎng)體系后,會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)搶精氨酸,導(dǎo)致細(xì)胞「吃不飽飯」,出現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)不良的癥狀:生長(zhǎng)速率異常、活力下降、易脫壁等等。
  如果你培養(yǎng)的細(xì)胞出現(xiàn)以下情況,基本可以確定是支原體感染了,不放心的話可以再配合支原體檢測(cè)試劑(檢測(cè)神器幫你揪出培養(yǎng)基中的支原體?。┻M(jìn)一步確認(rèn)。
  支原體DNA抽提Kit細(xì)胞被支原體污染后的表現(xiàn)
  1.細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢
  2.細(xì)胞變形
  3.培養(yǎng)基中碎片增加
  4.細(xì)胞易聚團(tuán)
  5.鏡下觀察有小黑點(diǎn)
  6.培養(yǎng)基提前變色
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