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細(xì)胞分離液的作用及實(shí)驗(yàn)步驟

更新時(shí)間:2019-10-17  |  點(diǎn)擊率:1317
   細(xì)胞分離液的作用及實(shí)驗(yàn)步驟
  細(xì)胞分離液使用說明:
  細(xì)胞分離液是通過運(yùn)用除去血液中的纖維蛋白或抗凝血?jiǎng)┨幚砣梭w血液;這種改良對(duì)于其他物種來源血液或者其他組織非常有必要。
  1.輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合
  2.無菌轉(zhuǎn)移3mlLSM到15ml離心管中。
  3.混合2ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2ml生理鹽水
  4.仔細(xì)的將稀釋血液加入3mlLSM(室溫)于15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。
  5.室溫下400g離心15-30分鐘,離心可以沉淀紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞同時(shí)可以再LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞,如上圖所示。
  6.吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿。
  7.吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM和轉(zhuǎn)移到另外的一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細(xì)胞離心管中,室溫離心10分鐘,離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻,例如160-260xg(去除LSM和降低血小板的百分比)。
  8.用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞。
  以上便是今天關(guān)于細(xì)胞分離液的作用及實(shí)驗(yàn)步驟的全部分享了,希望對(duì)大家今后使用本設(shè)備能有幫助。
 
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