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『細(xì)胞3D培養(yǎng)技術(shù)』大揭秘!

更新時(shí)間:2023-03-05  |  點(diǎn)擊率:675

與傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)不同,三維(3D)細(xì)胞培養(yǎng),可以更好地重現(xiàn)細(xì)胞在體內(nèi)的狀態(tài)。該方法正逐漸成為細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大熱門。

3D培養(yǎng)種類眾多,從原理上可以大致分為以下三類:


一、3D水凝膠培養(yǎng)

交聯(lián)的多聚鏈,或復(fù)雜的天然或合成蛋白分子組成的網(wǎng)絡(luò)構(gòu)成的水凝膠,具有與天然組織相似的生物物理學(xué)特性,因此,可以作為3D細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)。該材料可以單獨(dú)作為基質(zhì)使用,也可以與其他材料聯(lián)合使用。常見的3D水凝膠培養(yǎng)材料有有ECM凝膠、胞外基質(zhì)等。


該方法優(yōu)勢在于以下幾點(diǎn):

1.應(yīng)用歷程久,支持文獻(xiàn)較多;

2.提供天然生物配體;

3.通常含有生長因子和細(xì)胞因子。



二、細(xì)胞聚集

細(xì)胞聚集是指幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起形成菌團(tuán)的現(xiàn)象。懸滴培養(yǎng)板與低粘附平面等材料都能使細(xì)胞有很好的聚集效果。


該方法的優(yōu)勢在于以下幾點(diǎn):

1.有各種各樣的相關(guān)器材可供挑選

2.細(xì)胞成球的大小相對更好控制


三、培養(yǎng)支架

培養(yǎng)支架是一種提供物理支撐的培養(yǎng)手段,細(xì)胞可以進(jìn)入支架間隙生長并行使功能。培養(yǎng)支架大致可分為兩大類:

  • 天然支架(如膠原、明膠、纖維蛋白、幾丁聚糖等),生物兼容性,但穩(wěn)定性較差。

  • 合成支架(如聚苯乙烯、聚己內(nèi)酯、聚氨酯等),具有一致性、穩(wěn)定性比較好,生物兼容性較差。

該方式的優(yōu)勢在于以下幾點(diǎn):

1.一致性或生物兼容性都能夠照顧到;

2.與現(xiàn)有的生物培養(yǎng)器皿以及下游分析方法都有比較好的兼容。

無論是普通的細(xì)胞培養(yǎng)還是3D培養(yǎng),都需要合適的細(xì)胞培養(yǎng)體系,來給細(xì)胞提供營養(yǎng)與生長環(huán)境。胎牛血清作為一種重要的添加成分,其品質(zhì)的優(yōu)劣,在一定程度上決定了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否理想。


Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清,采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng),一旦胚胎發(fā)育好后這些因子自動(dòng)消失。因此8個(gè)月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。


出廠前均應(yīng)經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,并附詳細(xì)《檢測報(bào)告》,如pH值、滲透壓、內(nèi)毒素、病毒檢測、促細(xì)胞生長能力、無菌等檢查。其中,由于內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,對細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果影響較大,且不同批次的血清,內(nèi)毒素差異又不易控制。


Ausbian血清從出廠,到實(shí)驗(yàn)室,全程低溫冷鏈保護(hù),盡可能避免血清反復(fù)凍融。



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