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血清沉淀會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞污染嗎?

更新時(shí)間:2023-01-29  |  點(diǎn)擊率:820

血清沉淀會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞污染嗎?一般情況下,正常的沉淀物不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞污染。但多數(shù)情況下,血清沉淀會(huì)對(duì)我們判斷細(xì)胞是否出現(xiàn)污染造成困擾。絮狀沉淀容易和真菌、細(xì)菌混淆;磷酸鈣沉淀引起的小黑點(diǎn)容易與支原體污染混淆。

細(xì)胞培養(yǎng)中血清沉淀從何而來(lái)?

剛出廠(chǎng)的血清,應(yīng)該是澄清透明的,為了保證品質(zhì),血清會(huì)儲(chǔ)存在-20℃的環(huán)境中。如果運(yùn)輸過(guò)程中,出現(xiàn)了溫度忽高忽低,反復(fù)凍融的情況,就容易析出大量沉淀。另外,不正確的解凍方法也會(huì)引起血清產(chǎn)生大量沉淀。

細(xì)胞培養(yǎng)中如何減少血清沉淀?

1、正確的運(yùn)輸溫度:運(yùn)輸過(guò)程中,要嚴(yán)格-20℃低溫,避免反復(fù)凍融。

2、使用正確的融化方法:在使用時(shí),正確的解凍方法也很重要,這里推薦使用國(guó)際上通用的“三步法"解凍。

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需要注意的是,如果血清是儲(chǔ)存在-80℃冰箱中,正式解凍前應(yīng)先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中過(guò)渡。

一次解凍后,分裝至無(wú)菌離心管中,盡量保證每管是一次的用量,分裝管解凍也遵循三步法,解凍后需全部用完。

3、使用正確的儲(chǔ)存方式:長(zhǎng)期儲(chǔ)存在 2-8℃或在室溫下放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),都會(huì)引起沉淀,建議配制好的培養(yǎng)基在4℃冰箱中存放不要超過(guò)7天,血清分裝好后-20℃儲(chǔ)存。

4、特殊的處理:γ射線(xiàn)照射與熱滅活也容易引起沉淀析出,因此要注意射線(xiàn)照射劑量以及熱滅活方法(40℃水浴加熱20分鐘即可)。

細(xì)胞培養(yǎng)中如何去除沉淀?

如果要除去血清中的沉淀,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管中,大約400g 離心,留上清即可。由于濾膜容易被沉淀堵塞,因此不建議用過(guò)濾的方法。

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