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細(xì)胞培養(yǎng)之:特級(jí)胎牛血清

更新時(shí)間:2022-08-16  |  點(diǎn)擊率:644

許多臨床和做科研的小伙伴們都要涉及到細(xì)胞培養(yǎng),在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,血清無(wú)疑成為影響實(shí)驗(yàn)成功與否的重要因素,而在眾多血清之中,牛血清是最為常用的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,其中含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物,而且血清的組成及含量通常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質(zhì),多肽類(lèi),激素類(lèi),其他成分 如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。

一、胎牛血清的功能

血清的成分十分復(fù)雜,既有協(xié)助物質(zhì)運(yùn)輸?shù)牡鞍?、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),還有促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的激素和因子等,正因?yàn)檠暹@種天然成分的復(fù)雜性,使得血清在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)揮了多種功能:

1.提供維持細(xì)胞生長(zhǎng)的激素,促進(jìn)所培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng);

2.彌補(bǔ)基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或含量很少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);

3.提供結(jié)合蛋白,促進(jìn)細(xì)胞識(shí)別和利用維生素、脂類(lèi)和其他激素等;

4.某些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用;

5.促進(jìn)細(xì)胞貼壁,提供可促進(jìn)細(xì)胞鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)的因子;

6.起酸堿度緩沖液作用;

7.提供蛋白酶抑制劑,使細(xì)胞消化時(shí)殘留的胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。


二、胎牛血清有哪些重要的技術(shù)性指標(biāo)?

1.內(nèi)毒素:標(biāo)準(zhǔn)為不高于10EU/mL。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分,因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)系列過(guò)程中的無(wú)菌操作情況。

2.總蛋白含量:胎牛血清總蛋白含量般范圍是30-50mg/mL,數(shù)值偏高,說(shuō)明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。

3.血紅蛋白:標(biāo)準(zhǔn)為不高于30mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高。

4.pH:7.0~8.0。

5.微生物:包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類(lèi)病原性病毒等。

6.免疫球蛋白(IgG):免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血時(shí)的牛齡情況,新生牛的血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清不含IgM,另外IgG的含量也較低。


科研實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個(gè)重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級(jí)胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。


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