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和你聊聊胎牛血清的相關(guān)知識(shí)

更新時(shí)間:2022-01-18  |  點(diǎn)擊率:1386

許多臨床和做科研的小伙伴們都要涉及到細(xì)胞培養(yǎng),在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,血清無(wú)疑成為影響實(shí)驗(yàn)成功與否的重要因素,而在眾多血清之中,牛血清是尤為常用的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,其中含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物,而且血清的組成及含量通常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質(zhì),多肽類(lèi),激素類(lèi),其他成分 如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。

牛血清根據(jù)取材時(shí)間不同而有不同的區(qū)分。

胎牛血清:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過(guò)心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清

(1).特級(jí)胎牛血清:40納米過(guò)濾,內(nèi)毒素含量≤10EU, 血紅蛋白含量≤10mg/dl。

(2).優(yōu)等胎牛血清:經(jīng)過(guò)3次100納米過(guò)濾,內(nèi)毒素含量≤25EU/ml,血紅蛋白含量≤25mg/ml。

(3).標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清:3次100納米過(guò)濾,低內(nèi)毒素, 低血紅蛋白含量。

(4).活性碳/葡聚糖處理血清:激素含量大大降低。

(5).透析型胎牛血清:次huang嘌呤和胸腺核苷含量大大降低。

因此,如何在使用過(guò)程中保護(hù)這些因子的活性,達(dá)到最大的細(xì)胞培養(yǎng)效果,就需要正確地使用胎牛血清。

正確地使用胎牛血清可分為以下四個(gè)方面:

1. 正確儲(chǔ)存,避免反復(fù)凍融

1) 血清在-20°C凍存。

2) 血清避免反復(fù)凍融,以免降低因子活性。如一次用不完,應(yīng)進(jìn)行分裝。

3) 血清和培養(yǎng)基應(yīng)盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”,配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。

4) 血清避免在4°C或更高溫度靜置過(guò)久,否則會(huì)破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。

 

2. 正確的融化

國(guó)際上流行的【血清融化三步法】可最大限度地保存血清中因子的活性,不會(huì)產(chǎn)生沉淀,同時(shí)能縮短血清融化時(shí)間。具體如下:

 

image.png

3. 關(guān)于胎牛血清的滅活

真正的胎牛血清因?yàn)樘ヅ](méi)有形成有效補(bǔ)體,如果針對(duì)補(bǔ)體滅活的話(huà),就不需要。其他情況根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來(lái)決定。

4. 胎牛血清的濃度

胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混合后配成*培養(yǎng)基。

曾有文獻(xiàn)報(bào)道,不同胎牛血清濃度對(duì)細(xì)胞存在一定的影響,尤其是干細(xì)胞和原代細(xì)胞。具體最佳濃度需要用戶(hù)根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)來(lái)確定,以既保證培養(yǎng)的效果,又避免血清的浪費(fèi)。

 

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