国产av日韩a∨亚洲av电影,chinese体育生打飞j视频,娇妻系列交换27部多p在线观看,日韩丰满少妇无码内射

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟是什么?

細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟是什么?

更新時(shí)間:2022-01-04  |  點(diǎn)擊率:922

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細(xì)胞在體外條件下的生長,在培養(yǎng)的過程中細(xì)胞不再形成組織(動(dòng)物)。培養(yǎng)物是單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群。細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)都要生活在人工環(huán)境中,由于環(huán)境的改變,細(xì)胞的移動(dòng)或受一些其他因素的影響,培養(yǎng)時(shí)間加長,傳代導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)單一化型。

一、細(xì)胞復(fù)蘇

將凍存細(xì)2113胞從液氮5261中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融4102化。移人15ml離心管中,加入10ml預(yù)熱1653的DMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。

加入10mlDMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入10mlDMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

二、細(xì)胞傳代

細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí).去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加人1mlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。

加入10mlPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。再加入10mlPBS(經(jīng)高壓滅菌,保存于40C),吹勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),按照1×106/盤接種,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

三、細(xì)胞凍存

細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加入lmlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。加入10mlPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。

加入lml凍存液(90%血清,10%DMSO),放入凍存盒內(nèi)(盒內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入一80℃冰箱內(nèi),過夜,第二天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。

凍存液的配制:70%的*培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。


科研實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個(gè)重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級(jí)胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。


朋友新婚人妻无套| 蜜臀av999无码精品国产专区| 国产av夜夜欢一区二区三区| 拔萝卜高清视频大全免费观看| 久久精品卫校国产小美女| 岛国无码AV不卡一区二区| 久久久国产精华液| 国产成人无码视频一区二区三区| 夜来香视频免费观看| 少妇下蹲露大唇无遮挡| 日本三级欧美三级人妇视频| 亚洲中文字幕无码中文字在线| 久久国产精品无码一区二区三区| 无码av天堂一区二区三区| 久久久噜噜噜久久熟女aa片| 久久九九久精品国产免费直播 | 无码aⅴ免费中文字幕久久 | 粗大的内捧猛烈进出小视频| 国产精品扒开腿做爽爽爽视频| 少妇无码久久一区二区三区| 日韩av高清无码| 亚洲日韩VA无码中文字幕| 精品一区二区三区在线视频| 无码熟妇人妻AV影音先锋| 亚洲熟妇AV一区二区三区浪潮| 99久久久无码国产精品不卡| 亚洲色大成网站WWW久久九九 | 性按摩XXXX在线观看| 久久精品国产99久久丝袜| 成人做爰a片免费看网站| 无码人妻精品一区二区蜜桃| 国产伦精品一区二区三区免费迷| 97无人区夜夜夜爽涩日本无码| 久久精品国产男包| 日韩99在线 | 中文| 最近2019好看的中文字幕免费| 99久久精品免费看国产| 野花免费观看高清在线4| 尤物视频在线观看| 差差差30分钟无盖视频| 国产成人精品一区二三区在线观看|