国产av日韩a∨亚洲av电影,chinese体育生打飞j视频,娇妻系列交换27部多p在线观看,日韩丰满少妇无码内射

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)的方法

常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)的方法

更新時(shí)間:2021-12-27  |  點(diǎn)擊率:672

科研實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個(gè)重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級(jí)胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。

常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)的方法:

初代培養(yǎng)

原理

將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。


儀器、材料及試劑

儀器:培養(yǎng)箱(調(diào)整至37℃),培養(yǎng)瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術(shù)器械、血球計(jì)數(shù)板、離心機(jī)、水浴箱(37℃)

材料:動(dòng)物組織塊

試劑:1640培養(yǎng)基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank′s液,碘酒

初代消化培養(yǎng)法

1.準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2.布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。

3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。

4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。

5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次,如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí),可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7.計(jì)數(shù):用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。

8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時(shí)需要換新塞。


少妇人妻偷人精品无码av | 久久99精品国产99久久| 女人高潮抽搐喷液30分钟视频| 丁香花视频在线观看完整版 | 国产人妻高清国产拍精品| 亚洲熟妇无码久久精品| 国产激情久久久久影院老熟女免费| 97性无码区免费| 精品人妻人人爽久久爽av| 麻豆a片爽爽歪歪爽爽视频看看| 青青河边草免费观看视频免费 | 免费精品99久久国产综合精品| 久久精品国产99久久久香蕉| 色吊丝av中文字幕| 8AV国产精品爽爽ⅤA在线观看 | 漂亮的保姆5在线观看中文| 亚洲av人人澡人人爽人人夜夜| 欧美牲交a欧美牲交aⅴ久久| 成人h视频在线观看| 国产成人A亚洲精V品无码| 欧美精品国产综合久久| 国模无码视频一区二区三区| 人妻无奈被迫屈辱1-9| 亚洲成AV人片在线观看无 | 中文字幕丰满乱孑伦无码专区| 国产男女无遮挡猛进猛出| 国产精品久久成人网站| 精品久久久久久综合日本| 国产精品久久久久久无码| 久久综合伊人77777麻豆| 国产伦精品一区二区三区| 国产伦孑沙发午休精品| AV一区二区三区人妻少妇| 亚洲精品久久久久中文字幕二区| 欧美激情综合色综合啪啪五月| 狠狠色综合tv久久久久久| 漂亮的保姆5在线观看中文| 亚洲国产精品成人综合色在线| 久久人人爽人人爽人人片Ⅴ| 国产精品天堂avav在线| 久久99精品久久久久麻豆|