萬古霉素是一種抗生素，通過干擾細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)中的肽聚糖來干擾細(xì)胞壁的合成，抑制細(xì)胞壁中磷脂和多肽的生成，以抑制細(xì)菌生長繁殖。

耐萬古霉素腸球菌（Vancomycin-Resistant Enterococcus，簡稱VRE），是腸球菌屬下的一種細(xì)菌，有著對萬古霉素這種抗生素的抗藥性。主要分布在哺乳動物腸內(nèi)、消化道和尿道中（1）。VRE感染多發(fā)生于免疫力低下者，癌癥、肝硬化、幔性腎炎尿毒癥、腦梗死等重癥住院患者,主要造成肺部、腹腔、血液、手術(shù)傷口、泌尿道感染，致死率很高（2）。

腸球菌感染作為一種引起醫(yī)院感染的主要致病菌，已經(jīng)引起醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。例如我國在1986年就開始對全國醫(yī)院中的對耐藥葡萄球菌和耐萬古霉素腸球菌進行監(jiān)測；2015年修訂《臨床抗菌藥物合理應(yīng)用指導(dǎo)原則》等。為降低VRE感染風(fēng)險，提高VRE菌檢率，加強對耐藥菌的監(jiān)測，尤其對易感人群耐藥菌的監(jiān)測非常重要。

HiMedia公司的HiCrome系列培養(yǎng)基產(chǎn)品，操作便捷，更加環(huán)保，特異性和靈敏度高，準(zhǔn)確率達99%，價格更低且貨期穩(wěn)定。

HiCrome耐萬古霉素腸球菌顯色培養(yǎng)基（貨號：M1830，品名：HiCrome VRE Agar Base）

用于從臨床樣本中鑒定耐萬古霉素腸球菌。例如，M1830曾被用于研究護士白大衣中的VRE細(xì)菌污染（3）。

VRE通常在醫(yī)院和慢病護理機構(gòu)中傳播，例如對患者的糞便鏡下計數(shù)會導(dǎo)致醫(yī)院環(huán)境的污染和傳染。傳統(tǒng)已有許多培養(yǎng)基用于檢測VRE，如耐萬古霉素腸球菌基礎(chǔ)肉湯或瓊脂，或者是添加萬古霉素的膽汁七葉苷瓊脂。

M1830培養(yǎng)基中的特別蛋白胨提供氮源和碳源化合物、長鏈氨基酸、維生素和其他生長所需的必要營養(yǎng)；氯化鈉維持滲透壓平衡；緩沖鹽提供緩沖系統(tǒng)；添加劑可選擇性分離耐萬古霉素的腸球菌。

加入添加劑（FD277），35-37℃培養(yǎng)24-48小時后，耐萬古霉素糞腸球菌接種量為50-100CFU，在培養(yǎng)基上旺盛生長，裂解培養(yǎng)基中的顯色底物，產(chǎn)生藍(lán)綠色菌落，在不透明的凝膠背景下十分清晰（圖1），且回收率≥50％. 糞腸球菌和金黃色葡萄球菌接種量均＞10³CFU，生長受到抑制，回收率為0％.

圖1：M1830，耐萬古霉素糞腸球菌落呈藍(lán)綠色。

HiCrome第二代耐萬古霉素腸球菌顯色培養(yǎng)基（貨號：M1925 ，品名：HiCrome VRE Agar Base, Modified）推薦用于從臨床樣本中選擇性分離和鑒別耐萬古霉素的糞腸球菌和屎腸球菌。

M1925中的特別蛋白胨提供微生物生長必要的養(yǎng)分和維生素；氯化鈉維持滲透壓平衡；酚紅為pH指示劑，阿拉伯糖為發(fā)酵糖。添加劑（FD277）用于選擇性分離耐萬古霉素的腸球菌。

35-37℃培養(yǎng)24-48小時后，由于腸球菌屬含葡萄糖苷酶，可裂解培養(yǎng)基中的顯色底物，產(chǎn)生藍(lán)色菌落；屎腸球菌發(fā)酵阿拉伯糖，裂解顯色底物，產(chǎn)生綠色菌落和黃色背景。（圖2）

其中，耐萬古霉素糞腸球菌（VRE）與耐萬古霉素屎腸球菌（VRE）接種量分別為50-100CFU，生長旺盛且回收率≥50％.糞腸球菌和金黃色葡萄球菌接種量均＞10³CFU，生長受到抑制，回收率為0％.

圖2：M1925，左側(cè)：耐萬古霉素屎腸球菌為綠色菌落，右側(cè)：耐萬古霉素糞腸球菌成藍(lán)綠色菌落

以上兩款培養(yǎng)基可直接用來自篩查拭子的菌液接種。應(yīng)將分離的菌落制備為液體菌液，其濁度大約為0.5 McFarland單位。

參考文獻：

1. Mara D.,Horan NJ: The Handbook of water, wasterwater and microbiology. Amsterdam, The Netherlands, Academic Press;2003

2. Mascini EM, Bonten MJ: Vancomycin-resistant enterococci: consequences for therapy and infection control. Clin Microbiol Infect. 2005, 11(Suppl.4):43-56

3.Priyanka Gupta MSc, Nilanjana Bairagi PhD , Richa Priyadarshini PhD.Bacterial contamination of nurses' white coats after first and second shift. American Journal of Infection Control[J]. 2017,45(1): 86-88.

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